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通俗的讲,表达序列标签就像是基因的身份证,上面有你叫什么名字,什么时候出生,户口所在的住址等等。
人类的基因数据库极其庞大,从表达序列标签数据库中挑选特异性表达基因,就相当于是从公安的身份系统中,挑选一部分符合某个条件的特定人群。
挑选出这些基因是第一步,之后要使用生物、化学、遗传学等方法,来确定这些基因在干细胞中,保持生物学功能。
也就是说,得知道这一段基因进入干细胞后,还能否继续正常运转。如果不能正常运转,那段基因就没有用。
历史上,这个挑选的过程就从2003年持续到2006年,整整挑选了三年。
张伟当然不可能花三年的时间去筛选基因,他兑换来的论文里有写,能够省城ips细胞的四个转基因,分别是oct34、x2、c-yc和klf4。
所以张伟只需要将这四个基因转入细胞中,就能够得到实验成果
然而能够在干细胞中正常运转的基因那么多,要是张伟单单挑了这四个,最后还成功了,那肯定是没法解释的。
所以该做的样子还是要做的,张伟还是另外挑选了二十个基因,然后再加上这四个基因,组成了二十四个基因,让团队去做实验。
……
实验用的几十只小白鼠已经,已经来到试验台前。
“这个项目,我之前也做了一些先期的研究,我已经挑选出了最有希望产生诱导反应的24个基因,作为我们第一批的实验对象。这些基因,各位应该都不陌生,都是比较常见的基因。”
张伟话音顿了顿,接着说道:“关于诱导细胞的宿主,我打算采用成纤维细胞。”
“张sir,为什么是成纤维细胞?为什么不用其他细胞作为宿主?”立刻有人举手问道。
“这个问题问的很好!”张伟微微一笑,心中却吐槽道,我哪知道为什么选择成纤维细胞作为诱导细胞!人家论文上就这么写的!
只见张伟面不改色心不跳的望向了倒霉蛋儿山姆:“山姆,你来给大家讲一讲,我们为什么选择成纤维细胞作为诱导细胞的宿主!”
山姆猛的一愣,他本以为张伟会直接说出原因,却没想到张伟来了个“元芳,你怎么看!”
对于助理教授而言,这个问题不难回答,也是山姆开口答道:“我们都知道,成纤维细胞的主要功能是制造胶原蛋白等蛋白质。
除此之外,成纤维细胞还能合成和分泌糖胺多糖和糖蛋白等基质成分,这些成分对于维持组织的结构和功能至关重要。
在组织修复和再生过程中,成纤维细胞能够增殖并迁移到受损部位,参与组织的修复和重建。
另外成纤维细胞还具有一定的可塑性,在特定的生理或病理条件下,成纤维细胞可以转化为其他类型的细胞,如肌成纤维细胞。
增值性和可塑性,也都是干细胞的特点,我们要诱导细胞去产生干细胞的特性,自然要选择与干细胞有相似之处的细胞作为诱导细胞的宿主。”
“原来如此,涨知识了。”张伟心中暗道,嘴上却开口说:
“山姆回答的非常全面。大家应该明白我为什么要选择成纤维细胞作为诱导细胞载体了吧?各位还有其他问题么?”
“张sir,请问我们该采用什么载体将基因导入到细胞当中?”这次提问是那个博士后,他显然是问出了一个关键性的问题。
“我打算采用逆转录病毒作为基因载体。”张伟回答说。
“我觉得使用慢病毒载体,会不会更好一些?与逆转录病毒相比,慢病毒不仅可以感染分裂细胞,还能感染非分裂细胞。
而且慢病毒载体具有较强的转录后基因沉默效果,导入的目的基因可以在宿主细胞中长期持续地表达。”博士后说出了自己的建议。
“你提到了一个很关键性的问题,其实在实验之前,我也在纠结,到底是使用逆转录病毒在为基因载体,还是使用慢病毒作为基因载体,我甚至想过两个一起用。
但考虑到经费问题,为了节约成本,经过我反复思考后,最终还是决定使用你转录病毒作为基因载体。山姆,你来说说,为什么我们要选择逆转录病毒作为载体!”
张伟又望向了倒霉蛋儿山姆,继续元芳,你怎么看?
山姆又是一愣,话说项目负责人是你啊,决定实验方向的人也是你啊,你自己不回答,怎么总问我啊!
我是倒霉蛋儿,可我不是工具人啊!
不过山姆毕竟还是有真才实学的,这个问题也难不倒他。
“慢病毒作为载体,有一个缺点,那就是需要在包装细胞中产生活病毒,并测定病毒滴度……”
倒霉蛋儿工具人山姆,滔滔不绝的开始解释起来。
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